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Pourquoi les lignées cellulaires sont-elles congelées en phase vapeur ?


Pour la plupart des lignées cellulaires que j'ai rencontrées, l'ATCC recommande de les stocker dans la phase vapeur de l'azote liquide. Je prends cela pour signifier n'importe quel endroit au-dessus du niveau de liquide dans le réservoir de stockage d'azote. Quelle est la raison pour ça? Dans quelles conditions/exigences stockerait-on des cellules/tissus immergés dans un liquide ?


Le stockage lui-même peut se faire aussi bien en phase liquide qu'en phase vapeur dans l'azote liquide. Chacun a ses avantages et ses inconvénients. D'après mon expérience, il y a deux raisons principales pour lesquelles le stockage en phase vapeur (bien qu'il puisse y avoir des fluctuations de température lorsque l'azote devient bas) est recommandé.

Tout d'abord, vous évitez les contaminations croisées de vos lignées cellulaires avec des mycoplasmes (et d'autres contaminants éventuels) qui peuvent être transférés dans la phase d'azote liquide puis dans vos autres cultures. Ce n'est pas un danger théorique, mais bien réel. Voir les documents dans la référence ci-dessous.

Ensuite, de l'azote liquide entrera dans vos cryotubes (ce qui est aussi la cause des contaminations). Si vous utilisez des tubes qui ne sont pas explicitement conçus pour ce type de stockage (ce qui n'est pas un problème pour le stockage en phase vapeur), alors l'azote liquide qui est entré dans le tube se dilatera lors de la décongélation et peut faire exploser votre tube. Cela peut causer des blessures. Pour plus de détails voir ici et ici.

Les références:

  1. Risque de contamination du matériel génétique lors de la cryoconservation et de la cryobanque en unités de FIV.
  2. Contamination microbienne des embryons et du sperme lors d'une mise en banque à long terme dans de l'azote liquide


Voir la vidéo: MOOC côté labo: La congélation (Décembre 2021).